דאנק איר פֿאַר באזוכן Nature.com.דער בלעטערער ווערסיע איר נוצן האט לימיטעד CSS שטיצן.פֿאַר דער בעסטער דערפאַרונג, מיר רעקאָמענדירן אַז איר נוצן אַ דערהייַנטיקט בלעטערער (אָדער דיסייבאַל קאַמפּאַטאַבילאַטי מאָדע אין Internet Explorer).אין דער דערווייל, צו ענשור פארבליבן שטיצן, מיר וועלן מאַכן דעם פּלאַץ אָן סטיילז און דזשאַוואַסקריפּט.
גענע וועקטאָרס פֿאַר די באַהאַנדלונג פון פּולמאַנערי סיסטיק פיבראָסיס מוזן זיין טאַרגעטעד צו די קאַנדאַקטיוו אַירווייַס, ווייַל פּעריפעראַל לונג טראַנסדוקציע האט קיין טעראַפּיוטיק ווירקונג.די עפעקטיווקייַט פון וויראַל טראַנסדוקציע איז גלייַך שייַכות צו די וווינאָרט צייט פון די טרעגער.אָבער, עקספּרעס פלוידס אַזאַ ווי דזשין קאַריערז געוויינטלעך דיפיוז אין די אַלוועאָלי בעשאַס ינאַליישאַן, און טעראַפּיוטיק פּאַרטיקאַלז פון קיין פאָרעם זענען ראַפּאַדלי אַוועקגענומען דורך מיוקאַסילאַרי אַריבערפירן.יקסטענדינג די וווינאָרט צייט פון דזשין קאַריערז אין די רעספּעראַטאָרי שעטעך איז וויכטיק אָבער שווער צו דערגרייכן.קאַריער-קאָנדזשוגאַטעד מאַגנעטיק פּאַרטיקאַלז וואָס קענען זיין דירעקטעד צו די ייבערפלאַך פון די רעספּעראַטאָרי שעטעך קענען פֿאַרבעסערן רעגיאָנאַל טאַרגאַטינג.רעכט צו פּראָבלעמס מיט אין וויוואָו ימאַגינג, די נאַטור פון אַזאַ קליין מאַגנעטיק פּאַרטיקאַלז אויף די אַירווייַ ייבערפלאַך אין דעם בייַזייַן פון אַ געווענדט מאַגנעטיק פעלד איז שוואַך פארשטאנען.דער ציל פון דעם לערנען איז געווען צו נוצן סינקראָטראָן ימידזשינג צו וויזשוואַלייז אין וויוואָו די באַוועגונג פון אַ סעריע פון ​​מאַגנעטיק פּאַרטיקאַלז אין די טראַטשעאַ פון אַנעסטעטיזעד ראַץ אין סדר צו לערנען די דינאַמיק און פּאַטערנז פון נאַטור פון איין און פאַרנעם פּאַרטיקאַלז אין וויוואָו.דערנאָך מיר אויך אַססעססעד צי עקספּרעס פון לענטיוויראַל מאַגנעטיק פּאַרטיקאַלז אין דעם בייַזייַן פון אַ מאַגנעטיק פעלד וואָלט פאַרגרעסערן די עפעקטיווקייַט פון טראַנסדוקציע אין די שטשור טראַטשעאַ.סינקראָטראָן X-Ray ימאַגינג ווייזט די נאַטור פון מאַגנעטיק פּאַרטיקאַלז אין סטיישאַנערי און מאָווינג מאַגנעטיק פעלדער אין וויטראָ און אין וויוואָו.פּאַרטיקאַלז קענען ניט זיין לייכט שלעפּט אַריבער די ייבערפלאַך פון לעבעדיק ערווייז ניצן מאַגנאַץ, אָבער בעשאַס אַריבערפירן, דיפּאַזאַץ זענען קאָנצענטרירט אין די מיינונג פעלד, ווו די מאַגנעטיק פעלד איז סטראָנגעסט.טראַנסדוקטיאָן עפעקטיווקייַט איז אויך געוואקסן זעקס-פאַרלייגן ווען לענטיוויראַל מאַגנעטיק פּאַרטיקאַלז זענען איבערגעגעבן אין דעם בייַזייַן פון אַ מאַגנעטיק פעלד.צוזאַמען, די רעזולטאַטן פֿאָרשלאָגן אַז לענטיוויראַל מאַגנעטיק פּאַרטיקאַלז און מאַגנעטיק פעלדער קען זיין ווערטפול אַפּראָוטשיז צו פֿאַרבעסערן דזשין וועקטאָר טאַרגאַטינג און טראַנסדוקציע לעוועלס אין די קאַנדאַקטיוו אַירווייַס אין וויוואָו.
סיסטיק פיבראָסיס (CF) איז געפֿירט דורך ווערייישאַנז אין אַ איין דזשין גערופן די CF טראַנסמעמבראַנע קאַנדאַקטאַנס רעגולאַטאָר (CFTR).די CFTR פּראָטעין איז אַ יאָן קאַנאַל וואָס איז פאָרשטעלן אין פילע עפּיטעליאַל סעלז איבער דעם גוף, אַרייַנגערעכנט די אַירווייַס, אַ הויפּט פּלאַץ אין די פּאַטאַדזשענעסיס פון סיסטיק פיבראָסיס.חסרונות אין CFTR פירן צו אַבנאָרמאַל וואַסער אַריבערפירן, דיכיידריישאַן פון די אַירווייַ ייבערפלאַך און דיקריסט אַירווייַ ייבערפלאַך פליסיק שיכטע (אַסל) טיפקייַט.עס אויך ימפּערז די פיייקייט פון די מיוקאַסיליאַרי אַריבערפירן (מקט) סיסטעם צו ויסמעקן די אַירווייַס פון ינכיילד פּאַרטיקאַלז און פּאַטאַדזשאַנז.אונדזער ציל איז צו אַנטוויקלען אַ לענטיוויראַל (LV) דזשין טעראַפּיע צו צושטעלן די ריכטיק קאָפּיע פון ​​​​די CFTR דזשין און פֿאַרבעסערן ASL, MCT און לונג געזונט, און פאָרזעצן צו אַנטוויקלען נייַע טעקנאַלאַדזשיז וואָס קענען מעסטן די פּאַראַמעטערס אין וויוואָ1.
LV וועקטאָרס זענען איינער פון די לידינג קאַנדאַדייץ פֿאַר סיסטיק פיבראָסיס דזשין טעראַפּיע, דער הויפּט ווייַל זיי קענען פּערמאַנאַנטלי ויסשטימען די טעראַפּיוטיק דזשין אין אַירווייַ בייסאַל סעלז (ערוויי סטעם סעלז).דאָס איז וויכטיק ווייַל זיי קענען ומקערן נאָרמאַל כיידריישאַן און מיוקאַס רעשוס דורך דיפערענשיייטינג אין פאַנגקשאַנאַל דזשין-קערעקטיד אַירווייַ ייבערפלאַך סעלז פֿאַרבונדן מיט סיסטיק פיבראָסיס, ריזאַלטינג אין לעפלאָנג בענעפיץ.LV וועקטאָרס מוזן זיין דירעקטעד קעגן די קאַנדאַקטיוו אַירווייַס, ווייַל דאָס איז ווו לונג ינוואַלוומאַנט אין CF הייבט.עקספּרעס פון די וועקטאָר דיפּער אין די לונג קען רעזולטאַט אין אַלוועאָלאַר טראַנסדוקציע, אָבער דאָס האט קיין טעראַפּיוטיק ווירקונג אין סיסטיק פיבראָסיס.אָבער, פלוידס אַזאַ ווי דזשין קאַריערז געוויינטלעך מייגרייט אין די אַלוועאָלי ווען ינכיילד נאָך קימפּעט3,4 און טעראַפּיוטיק פּאַרטיקאַלז זענען ראַפּאַדלי יקספּעלד אין די מויל קאַוואַטי דורך MCTs.די עפעקטיווקייַט פון LV טראַנסדוקציע איז גלייַך שייַכות צו די לענג פון צייט וואָס די וועקטאָר בלייבט נאָענט צו די ציל סעלז צו לאָזן סעליאַלער אַפּטייק - "וווינאָרט צייט" 5 וואָס איז לייכט פאַרקירצט דורך טיפּיש רעגיאָנאַל ערפלאָו און קאָואָרדאַנייטיד אַפּטייק פון מיוקאַס און MCT פּאַרטיקאַלז.פֿאַר סיסטיק פיבראָסיס, די פיייקייט צו פאַרלענגערן LV וווינאָרט צייט אין די אַירווייַס איז וויכטיק צו דערגרייכן הויך לעוועלס פון טראַנסדוקציע אין דעם געגנט, אָבער איז ביז איצט געווען טשאַלאַנדזשינג.
צו באַקומען דעם כערדאַל, מיר פאָרשלאָגן אַז LV מאַגנעטיק פּאַרטיקאַלז (מפּס) קענען העלפֿן אין צוויי קאַמפּלאַמענטשי וועגן.ערשטער, זיי קענען זיין גיידיד דורך אַ מאַגנעט צו די אַירווייַ ייבערפלאַך צו פֿאַרבעסערן טאַרגאַטינג און העלפֿן דזשין טרעגער פּאַרטיקאַלז צו זיין אין די רעכט געגנט פון די ערוויי;און ASL) מאַך אין צעל שיכטע 6. מפּס זענען וויידלי געניצט ווי טאַרגעטעד מעדיצין עקספּרעס וועהיקלעס ווען זיי בינדן צו אַנטיבאָדיעס, קימאָוטעראַפּי דרוגס, אָדער אנדערע קליין מאַלאַקיולז וואָס אַטאַטשט צו צעל מעמבריינז אָדער בינדן צו זייער ריספּעקטיוו צעל ייבערפלאַך ראַסעפּטערז און אַקיומיאַלייט אין אָנוווקס זייטלעך אין בייַזייַן פון סטאַטיק עלעקטרע.מאַגנעטיק פעלדער פֿאַר ראַק טעראַפּיע 7. אנדערע "היפּערטערמיק" מעטהאָדס זענען אַימעד צו מאָרד אָנוווקס סעלז דורך באַהיצונג מפּס ווען יקספּאָוזד צו אַסאַלייטינג מאַגנעטיק פעלדער.דער פּרינציפּ פון מאַגנעטיק טראַנספעקשאַן, אין וואָס אַ מאַגנעטיק פעלד איז געניצט ווי אַ טראַנספעקשאַן אַגענט צו פאַרבעסערן די אַריבערפירן פון דנאַ אין סעלז, איז קאַמאַנלי געניצט אין וויטראָ ניצן אַ קייט פון ניט-וויראַל און וויראַל דזשין וועקטאָרס פֿאַר שווער-צו-טראַנסדוסינג צעל שורות. ..די עפעקטיווקייַט פון LV מאַגנאָטטראַנספעקשאַן מיט די עקספּרעס פון LV MP אין וויטראָ אין אַ צעל שורה פון מענטש בראַנטשיאַל עפּיטהעליום אין דעם בייַזייַן פון אַ סטאַטיק מאַגנעטיק פעלד איז געגרינדעט, ינקריסינג די עפעקטיווקייַט פון טראַנסדוקציע מיט 186 מאל קאַמפּערד מיט די LV וועקטאָר אַליין.LV MT איז אויך געווענדט צו אַן אין וויטראָ מאָדעל פון סיסטיק פיבראָסיס, ווו מאַגנעטיק טראַנספעקשאַן געוואקסן לוו טראַנסדוקציע אין לופט-פליסיק צובינד קאַלטשערז מיט אַ פאַקטאָר פון 20 אין דעם בייַזייַן פון סיסטיק פיבראָסיס ספּוטום10.אָבער, אין וויוואָו אָרגאַן מאַגנעטאָטראַנספעקשאַן האט באקומען לעפיערעך קליין ופמערקזאַמקייט און איז בלויז עוואַלואַטעד אין אַ ביסל כייַע שטודיום11,12,13,14,15, ספּעציעל אין די לונגען16,17.אָבער, די פּאַסאַבילאַטיז פון מאַגנעטיק טראַנספעקשאַן אין לונג טעראַפּיע אין סיסטיק פיבראָסיס זענען קלאָר.טאן עט על.(2020) סטייטיד אַז "אַ וואַלאַדיישאַן לערנען אויף עפעקטיוו פּולמאַנערי עקספּרעס פון מאַגנעטיק נאַנאָפּאַרטיקלעס וועט ויסברוקירן דעם וועג פֿאַר צוקונפֿט CFTR ינאַליישאַן סטראַטעגיעס צו פֿאַרבעסערן קליניש אַוטקאַמז אין פּאַטיענץ מיט סיסטיק פיבראָסיס."
די נאַטור פון קליין מאַגנעטיק פּאַרטיקאַלז אויף די ייבערפלאַך פון די רעספּעראַטאָרי שעטעך אין דעם בייַזייַן פון אַ מאַגנעטיק פעלד איז שווער צו וויזשוואַלייז און לערנען, און דעריבער זיי זענען שוואַך פארשטאנען.אין אנדערע שטודיום, מיר האָבן דעוועלאָפּעד אַ סינטשראָטראָן פּראַפּאַגיישאַן באזירט פאַסע קאַנטראַסט X-Ray Imaging (PB-PCXI) אופֿן פֿאַר ניט-ינווייסיוו ימאַגינג און קוואַנטאַפאַקיישאַן פון מינוט אין וויוואָו ענדערונגען אין ASL18 טיפקייַט און MCT19 נאַטור, 20 צו גלייך מעסטן גאַז קאַנאַל ייבערפלאַך כיידריישאַן. און איז געניצט ווי אַ פרי גראדן באַהאַנדלונג יפעקטיוונאַס.אין אַדישאַן, אונדזער MCT סקאָרינג אופֿן ניצט פּאַרטיקאַלז מיט אַ דיאַמעטער פון 10-35 μם קאַמפּאָוזד פון אַלומינום אָדער הויך רעפראַקטיווע אינדעקס גלאז ווי MCT מאַרקערס קענטיק מיט PB-PCXI21.ביידע מעטהאָדס זענען פּאַסיק פֿאַר ימאַגינג אַ קייט פון פּאַרטאַקאַל טייפּס, אַרייַנגערעכנט מפּס.
רעכט צו דער הויך ספּיישאַל און טעמפּעראַל האַכלאָטע, אונדזער PB-PCXI-באזירט ASL און MCT אַסאַסאַז זענען געזונט סוטאַד צו לערנען די דינאַמיק און נאַטוראַל פּאַטערנז פון איין און פאַרנעם פּאַרטיקאַלז אין וויוואָו צו העלפֿן אונדז פֿאַרשטיין און אַפּטאַמייז MP דזשין עקספּרעס מעטהאָדס.דער צוגאַנג וואָס מיר נוצן דאָ איז באזירט אויף אונדזער שטודיום מיט די SPring-8 BL20B2 ביימלינע, אין וואָס מיר וויזשוואַלייזד פליסיק באַוועגונג נאָך עקספּרעס פון אַ דאָזע פון ​​​​אַ באָק וועקטאָר אין די נאַסאַל און פּולמאַנערי ערווייז פון מיסע צו העלפֿן דערקלערן אונדזער כעטעראַדזשיניאַס דזשין אויסדרוק פּאַטערנז. אין אונדזער דזשין.כייַע שטודיום מיט אַ טרעגער דאָזע פון ​​3.4 .
דער ציל פון דעם לערנען איז געווען צו נוצן די PB-PCXI סינטשראָטראָן צו וויזשוואַלייז אין וויוואָו מווומאַנץ פון אַ סעריע פון ​​מפּס אין די טראַטשעאַ פון לעבן ראַץ.די PB-PCXI ימאַגינג שטודיום זענען דיזיינד צו פּרובירן די MP סעריע, מאַגנעטיק פעלד שטאַרקייַט און אָרט צו באַשליסן זייער ווירקונג אויף MP באַוועגונג.מיר אנגענומען אַז אַ פונדרויסנדיק מאַגנעטיק פעלד וואָלט העלפֿן די איבערגעגעבן מף בלייַבן אָדער מאַך צו די ציל געגנט.די שטודיום אויך ערלויבט אונדז צו באַשליסן מאַגנעט קאַנפיגיעריישאַנז וואָס מאַקסאַמייז די סומע פון ​​פּאַרטיקאַלז לינקס אין די טראַטשעאַ נאָך דעפּאַזישאַן.אין אַ צווייטע סעריע פון ​​שטודיום, מיר אַימעד צו נוצן דעם אָפּטימאַל קאַנפיגיעריישאַן צו באַווייַזן די טראַנסדוקטיאָן מוסטער ריזאַלטינג פון אין וויוואָו עקספּרעס פון LV-MPs צו די שטשור אַירווייַס, אויף דער האַשאָרע אַז עקספּרעס פון LV-MPs אין דעם קאָנטעקסט פון אַירווייַ טאַרגאַטינג אין געוואקסן לוו טראַנסדוקטיאָן עפעקטיווקייַט..
אַלע כייַע שטודיום זענען געפירט אין לויט מיט פּראָטאָקאָלס באוויליקט דורך די אוניווערסיטעט פון אַדעלאַידע (M-2019-060 און M-2020-022) און די SPring-8 סינטשראָטראָן כייַע עטיקס קאַמיטי.די יקספּעראַמאַנץ זענען דורכגעקאָכט אין לויט מיט די רעקאַמאַנדיישאַנז פון ArrIVE.
אַלע רענטגענ-שטראַל בילדער זענען גענומען אין די BL20XU סטרימלינע ביי די SPring-8 סינטשראָטראָן אין יאַפּאַן מיט אַ סעטאַפּ ענלעך צו די דיסקרייבד פריער 21,22.בעקיצער, די יקספּערמענאַל קעסטל איז געווען ליגן 245 עם פון די סינטשראָטאָן סטאָרידזש רינג.א מוסטער-צו-דעטעקטאָר דיסטאַנסע פון ​​0.6 עם איז געניצט פֿאַר פּאַרטאַקאַל ימאַגינג שטודיום און 0.3 עם פֿאַר אין וויוואָו ימאַגינג שטודיום צו שאַפֿן פאַסע קאַנטראַסט יפעקץ.א מאַנאַקראָומאַטיק שטראַל מיט אַן ענערגיע פון ​​25 קעוו איז געניצט.די בילדער זענען קונה מיט אַ הויך האַכלאָטע X-Ray טראַנסדוסער (SPring-8 BM3) קאַפּאַלד צו אַ סקמאָס דעטעקטאָר.דער טראַנסדוסער קאַנווערץ רענטגענ-שטראַלן צו קענטיק ליכט מיט אַ 10 μm דיק סינטילאַטאָר (Gd3Al2Ga3O12), וואָס איז דאַן דירעקטעד צו די סקמאָס סענסער מיט אַ × 10 (NA 0.3) מיקראָסקאָפּ אָביעקטיוו.די סקמאָס דעטעקטאָר איז געווען אַן Orca-Flash4.0 (Hamamatsu Photonics, יאַפּאַן) מיט אַ מענגע גרייס פון 2048 × 2048 בילדצעלן און אַ רוי פּיקסעל גרייס פון 6.5 × 6.5 μm.די באַשטעטיקן גיט אַן עפעקטיוו יסאָטראָפּיק פּיקסעל גרייס פון 0.51 μם און אַ מיינונג פעלד פון בעערעך 1.1 מם × 1.1 מם.די ויסשטעלן געדויער פון 100 מיז איז געווען אויסדערוויילט צו מאַקסאַמייז די סיגנאַל-צו-ראַש פאַרהעלטעניש פון מאַגנעטיק פּאַרטיקאַלז ין און אַרויס די אַירווייַס בשעת מינאַמייזינג באַוועגונג אַרטאַפאַקץ געפֿירט דורך ברידינג.פֿאַר אין וויוואָו שטודיום, אַ שנעל X-Ray לאָדן איז געשטעלט אין די X-Ray וועג צו באַגרענעצן די ראַדיאַציע דאָזע דורך בלאַקינג די X-Ray שטראַל צווישן יקספּאָוזשערז.
LV מעדיע איז נישט געניצט אין קיין SPring-8 PB-PCXI ימאַגינג שטודיום ווייַל די BL20XU ימאַגינג קאַמער איז נישט ביאָסאַפעטי לעוועל 2 סערטאַפייד.Instead, we selected a range of well-characterized MPs from two commercial vendors covering a range of sizes, materials, iron concentrations, and applications , — first in order to understand how magnetic fields affect the movement of MPs in glass capillaries, and then in לעבעדיק אַירווייַס.ייבערפלאַך.
סאַמפּאַלז פֿאַר יעדער מפּ אין די טיש.1 איז געווען צוגעגרייט אין 20 μל גלאז קאַפּאַלעריז (Drummond Microcaps, PA, USA) מיט אַ ינערלעך דיאַמעטער פון 0.63 מם.קאָרפּוסקולאַר פּאַרטיקאַלז זענען בנימצא אין וואַסער, בשעת CombiMag פּאַרטיקאַלז זענען בנימצא אין דער פאַבריקאַנט ס פּראַפּרייאַטערי פליסיק.יעדער רער איז האַלב אָנגעפילט מיט פליסיק (בעערעך 11 μל) און געשטעלט אויף די מוסטער האָלדער (זען פיגורע 1).די גלאז קאַפּאַלעריז זענען געשטעלט כאָריזאַנטאַלי אויף דער בינע אין די ימאַגינג קאַמער, ריספּעקטיוולי, און פּאַזישאַנד בייַ די עדזשאַז פון די פליסיק.א 19 מם דיאַמעטער (28 מם לאַנג) ניקאַל-שאָל מאַגנעט געמאכט פון זעלטן ערד, נעאָדימיום, אייַזן און באָראָן (NdFeB) (N35, קאַט. נומער LM1652, Jaycar Electronics, אויסטראַליע) מיט אַ רעמאַנאַנס פון 1.17 ט איז געווען אַטאַטשט צו אַ באַזונדער אַריבערפירן טיש צו דערגרייכן רימאָוטלי טוישן דיין שטעלע בעשאַס רענדערינג.X-Ray ימאַגינג הייבט ווען די מאַגנעט איז פּאַזישאַנד בעערעך 30 מם אויבן די מוסטער און בילדער זענען קונה אין 4 ראָמען פּער סעקונדע.בעשאַס ימידזשינג, די מאַגנעט איז געבראכט נאָענט צו די גלאז קאַפּאַלערי רער (אין אַ ווייַטקייט פון וועגן 1 מם) און דעמאָלט אריבערגעפארן צוזאמען די רער צו אַססעסס די ווירקונג פון פעלד שטאַרקייַט און שטעלע.
אַן ינ וויטראָ ימידזשינג סעטאַפּ מיט מפּ סאַמפּאַלז אין גלאז קאַפּאַלעריז אין דער בינע פון ​​איבערזעצונג פון די xy מוסטער.דער וועג פון די X-Ray שטראַל איז אנגעצייכנט מיט אַ רויט דאַטיד שורה.
אַמאָל די ינ וויטראָ וויזאַביליטי פון מפּס איז געגרינדעט, אַ סאַבסעט פון זיי איז טעסטעד אין וויוואָו אויף ווילד-טיפּ ווייַבלעך וויסטאַר אַלבינאָ ראַץ (~ 12 וואָכן אַלט, ~ 200 ג).מעדעטאָמידינע 0.24 מג / קג (דאָמיטאָר®, זענאָק, יאַפּאַן), מידאַזאָלאַם 3.2 מג / קג (דאָרמיקום®, אַסטעללאַס פאַרמאַ, יאַפּאַן) און בוטאָרפאַנאַל 4 מג / קג (Vetorphale®, Meiji Seika).ראַץ זענען אַנאַסטעטיק מיט Pharma (יאַפּאַן) געמיש דורך ינטראַפּעריטאָנעאַל ינדזשעקשאַן.נאָך אַניסטיזשאַ, זיי זענען צוגעגרייט פֿאַר ימידזשינג דורך רימוווינג די פוטער אַרום די טראַטשעאַ, ינסערטינג אַן ענדאָטראַטשעאַל רער (ET; 16 Ga ינטראַווינאַס קאַנולאַ, טערומאָ בקט) און ימאָובאַלייזינג זיי אין די סופּינע שטעלע אויף אַ קאַסטאַמייזד ימאַגינג טעלער מיט אַ טערמאַל זעקל. צו טייַנען גוף טעמפּעראַטור.
(אַ) אין וויוואָו ימאַגינג סעטאַפּ אין די SPring-8 ימידזשינג אַפּאַראַט, X-Ray שטראַל וועג אנגעצייכנט מיט רויט דאַטיד שורה.(ב, C) טראַטשעאַל מאַגנעט לאָוקאַלאַזיישאַן איז דורכגעקאָכט רימאָוטלי ניצן צוויי אָרטאָגאָנאַללי מאָונטעד IP קאַמעראַס.אויף די לינקס זייַט פון די בילד אויף דעם עקראַן, איר קענען זען די דראָט שלייף האלטן די קאָפּ און די עקספּרעס קאַנולאַ אינסטאַלירן אין די עט רער.
א ווייַט קאַנטראָולד שפּריץ פּאָמפּע סיסטעם (UMP2, World Precision Instruments, Sarasota, FL) מיט אַ 100 μל גלאז שפּריץ איז פארבונדן צו אַ PE10 טובינג (0.61 מם אָד, 0.28 מם שייַן) מיט אַ 30 גאַ נאָדל.מארק די רער צו ענשור אַז די שפּיץ איז אין די ריכטיק שטעלע אין די טראַטשעאַ ווען ינסערטינג די ענדאָטראַטשעאַל רער.מיט אַ מיקראָפּאָמפּ, די שפּריץ פּלאַנדזשער איז אַוועקגענומען און די שפּיץ פון די רער איז געטובלט אין די מפּ מוסטער צו זיין איבערגעגעבן.די לאָודיד עקספּרעס רער איז דעמאָלט ינסערטאַד אין די ענדאָטראַטשעאַל רער, פּלייסינג די שפּיץ אין די סטראָנגעסט טייל פון אונדזער דערוואַרט געווענדט מאַגנעטיק פעלד.בילד אַקוואַזישאַן איז קאַנטראָולד מיט אַ אָטעם דעטעקטאָר קאָננעקטעד צו אונדזער אַרדוינאָ-באזירט טיימינג קעסטל, און אַלע סיגנאַלז (למשל טעמפּעראַטור, אָטעמען, לאָדן עפענען / נאָענט און בילד אַקוואַזישאַן) זענען רעקאָרדעד מיט Powerlab און LabChart (AD Instruments, סידני, אויסטראַליע) 22 ווען ימאַגינג.צו מינאַמייז באַוועגונג אַרטאַפאַקץ, איין בילד פּער אָטעם איז קונה בעשאַס די וואָקזאַל רעספּעראַטאָרי לויפן פּלאַטאָ.
דער מאַגנעט איז אַטאַטשט צו די רגע בינע, וואָס קען זיין ליגן רימאָוטלי אויף די אַרויס פון די ימידזשינג גוף.פאַרשידן שטעלעס און קאַנפיגיעריישאַנז פון די מאַגנעט זענען טעסטעד, אַרייַנגערעכנט: געשטעלט אין אַ ווינקל פון בעערעך 30 ° אויבן די טראַטשעאַ (קאַנפיגיעריישאַנז זענען געוויזן אין פיגיערז 2 אַ און 3 אַ);איין מאַגנעט אויבן די כייַע און די אנדערע אונטן, מיט די פּויליש שטעלן פֿאַר אַטראַקשאַן (פיגורע 3 ב)., איין מאַגנעט אויבן די כייַע און איינער אונטן, מיט די פּויליש שטעלן פֿאַר אָפּשטויסן (פיגורע 3 ק), און איין מאַגנעט אויבן און פּערפּענדיקולאַר צו די טראַטשעאַ (פיגורע 3 ד).נאָך באַשטעטיקן די כייַע און מאַגנעט און לאָודינג די מפּ אונטער פּראָבע אין די שפּריץ פּאָמפּע, צושטעלן אַ דאָזע פון ​​​​50 μל מיט אַ קורס פון 4 μl / סעק נאָך אַקוואַזישאַן פון בילדער.דער מאַגנעט איז דאַן אריבערגעפארן צוריק און צוריק צוזאמען אָדער אַריבער די טראַטשעאַ בשעת קאַנטיניוינג צו קריגן בילדער.
מאַגנעט קאַנפיגיעריישאַן פֿאַר אין וויוואָו ימאַגינג (אַ) איין מאַגנעט אויבן די טראַטשעאַ אין אַ ווינקל פון בעערעך 30 °, (ב) צוויי מאַגנאַץ קאַנפיגיערד פֿאַר אַטראַקשאַן, (c) צוויי מאַגנאַץ קאַנפיגיערד פֿאַר אָפּשטויסן, (ד) איין מאַגנעט אויבן און פּערפּענדיקולאַר צו די טראַטשעאַ.דער אבזערוואטער האט אראפגעקוקט פון מויל צו די לונגען דורך די טראטשעא און דער רענטגענ שטראל איז דורכגעגאנגען דורך די לינקע זייט פון די שטשור און ארויס פון די רעכטע זייט.דער מאַגנעט איז אָדער אריבערגעפארן צוזאמען די לענג פון די ערוויי אָדער לינקס און רעכט אויבן די טראַטשעאַ אין דער ריכטונג פון די X-Ray שטראַל.
מיר אויך געזוכט צו באַשטימען די וויזאַביליטי און נאַטור פון פּאַרטיקאַלז אין די אַירווייַס אין דער אַוועק פון מיקסינג פון רעספּעראַטיאָן און האַרץ קורס.דעריבער, אין די סוף פון די ימידזשינג צייַט, אַנימאַלס זענען כיומאַנאַלי יוטאַנייזד רעכט צו אַ אָוווערדאָוס פון פּענטאָבאַרביטאַל (Somnopentyl, Pitman-Moore, Washington Crossing, USA; ~ 65 מג / קג יפּ).עטלעכע אַנימאַלס זענען לינקס אויף די ימאַגינג פּלאַטפאָרמע, און נאָך די ופהער פון ברידינג און כאַרטביט, די ימידזשינג פּראָצעס איז ריפּיטיד, אַדינג אַן נאָך דאָזע פון ​​מפּ אויב קיין מפּ איז קענטיק אויף די ערוויי ייבערפלאַך.
די ריזאַלטינג בילדער זענען קערעקטאַד פֿאַר פלאַך און טונקל פעלד און דערנאָך פארזאמלט אין אַ פֿילם (20 ראָמען פּער סעקונדע; 15-25 × נאָרמאַל גיכקייַט דיפּענדינג אויף רעספּעריישאַן קורס) מיט אַ מנהג שריפט געשריבן אין MATLAB (R2020a, די מאַטהוואָרקס).
אַלע שטודיום אויף LV דזשין וועקטאָר עקספּרעס זענען געפירט אין די אוניווערסיטעט פון אַדעלאַידע לאַבאָראַטאָריע כייַע פאָרשונג צענטער און אַימעד צו נוצן די רעזולטאַטן פון די SPring-8 עקספּערימענט צו אַססעסס צי LV-MP עקספּרעס אין דעם בייַזייַן פון אַ מאַגנעטיק פעלד קען פאַרבעסערן דזשין אַריבערפירן אין וויוואָו .צו אָפּשאַצן די יפעקץ פון מף און מאַגנעטיק פעלד, צוויי גרופּעס פון אַנימאַלס זענען באהאנדלט: איין גרופּע איז ינדזשעקטיד מיט LV MF מיט מאַגנעט פּלייסמאַנט, און די אנדערע גרופּע איז ינדזשעקטיד מיט אַ קאָנטראָל גרופּע מיט LV MF אָן מאַגנעט.
לוו דזשין וועקטאָרס האָבן שוין דזשענערייטאַד ניצן פריער דיסקרייבד מעטהאָדס 25, 26.די LacZ וועקטאָר יקספּרעסאַז אַ יאָדער לאָוקאַלייזד ביתא-גאַלאַקטאָסידאַסע דזשין געטריבן דורך די MPSV קאַנסטאַטוטיוו פּראָמאָטער (LV-LacZ), וואָס טראגט אַ בלוי אָפּרוף פּראָדוקט אין טראַנסדוסעד סעלז, קענטיק אויף פראַנץ און סעקשאַנז פון לונג געוועב.טיטראַטיאָן איז דורכגעקאָכט אין צעל קאַלטשערז דורך מאַניואַלי קאַונטינג די נומער פון לאַקז-positive סעלז ניצן אַ העמאָסיטעמעטער צו רעכענען די טיטער אין טו / מל.קאַריערז זענען קריאָפּערוועד ביי -80 ° C, טאָד איידער נוצן, און געבונדן צו CombiMag דורך מיקסינג 1: 1 און ינגקיובייטינג אויף אייז פֿאַר בייַ מינדסטער 30 מינוט איידער עקספּרעס.
נאָרמאַל Sprague Dawley ראַץ (n = 3 / גרופּע, ~ 2-3 אַנעסטעטיזעד יפּ מיט אַ געמיש פון 0.4mg/kg מעדיטאָמידינע (דאָמיטאָר, יליום, אויסטראַליע) און 60mg/kg קעטאַמינע (יליום, אויסטראַליע) ביי 1 חודש פון עלטער) ) ינדזשעקשאַן און ניט-כירורגיש מויל קאַנאַל מיט אַ 16 ג ינטראַווינאַס קאַננולאַ.צו ענשור אַז טראַטשעאַל ערוויי געוועב נעמט לוו טראַנסדוקציע, עס איז קאַנדישאַנד מיט אונדזער פריער דיסקרייבד מעטשאַניקאַל פּערטערביישאַן פּראָטאָקאָל אין וואָס די טראַטשעאַל ערוויי ייבערפלאַך איז ראַבד אַקסאַלי מיט אַ דראָט קאָרב (N-Circle, ניטינאָל שטיין עקסטראַקטאָר אָן שפּיץ NTSE-022115) -UDH , קוק מעדיקאַל, USA) 30 פּ28.דערנאָך, וועגן 10 מינוט נאָך די פּערטערביישאַן אין די ביאָסאַפעטי קאַבינעט, טראַטשעאַל אַדמיניסטראַציע פון ​​LV-MP איז דורכגעקאָכט.
א 50 μl באַנד (2 קס 25 μl אַליקוואַץ) פון LV-MP איז געווען איבערגעגעבן צו די טראַטשעאַ (n = 3 אַנימאַלס) ניצן אַ געל-טיפּט פּיפּעטטע ווי דיסקרייבד פריער.די קאָנטראָל גרופּע (n = 3 אַנימאַלס) באקומען די זעלבע LV-MP אָן די נוצן פון אַ מאַגנעט.נאָך קאַמפּלישאַן פון די ינפיוזשאַן, די קאַננולאַ איז אַוועקגענומען פון די ענדאָטראַטשעאַל רער און די כייַע איז עקסטובייטיד.דער מאַגנעט בלייבט אין פּלאַץ פֿאַר 10 מינוט איידער זיין אַוועקגענומען.ראַץ זענען געהאלטן וואַרעם און באמערקט ביז גאַנץ אָפּזוך פון אַניסטיזשאַ.
LV-MP עקספּרעס מיטל אין אַ בייאַלאַדזשיקאַל זיכערקייַט קאַבינעט.איר קענען זען אַז די ליכט גרוי לוער-שלאָס אַרבל פון די עט רער פּראָוטרודז פון די מויל, און די געל פּייפּעט שפּיץ געוויזן אין די פיגור איז ינסערטאַד דורך די עט רער צו דער געוואלט טיפקייַט אין די טראַטשעאַ.
די געגנט פון LacZ אויסדרוק אין די טראַטשעאַל קאַמפּאַזאַט בילדער פון יעדער כייַע איז קוואַנטאַפייד מיט אַ אָטאַמייטיד MATLAB שריפט (R2020a, MathWorks) ווי פריער דיסקרייבד28, ניצן סעטטינגס פון 0.35 < כיו <0.58, סאַטוראַטיאָן> 0.15, און ווערט <0.7. די שטח פון LacZ אויסדרוק אין די טראַטשעאַל קאַמפּאַזאַט בילדער פון יעדער כייַע איז קוואַנטאַפייד מיט אַ אָטאַמייטיד MATLAB שריפט (R2020a, MathWorks) ווי פריער דיסקרייבד28, ניצן סעטטינגס פון 0.35 < כיו <0.58, סאַטוראַטיאָן> 0.15 און ווערט <0.7. Площадь экспрессии LacZ в составных изображениях трахеи от каждого животного была количественно определена с использованием автоматизированного сценария MATLAB (R2020a, MathWorks), как описано ранее28, с использованием настроек 0,35 <оттенок <0,58, насыщенность> 0,15 и значение <0 ,7. די שטח פון LacZ אויסדרוק אין קאָמפּאָסיטע טראַטשעאַל בילדער פון יעדער כייַע איז קוואַנטאַפייד מיט אַן אָטאַמייטיד MATLAB שריפט (R2020a, MathWorks) ווי פריער דיסקרייבד 28 ניצן סעטטינגס פון 0.350.15 און ווערט <0.7.如 前所 前所, 使用 自动 מאַטלאַב 脚本 (ר 1020 אַ, מאַטווערקס) 对对 每 只 动物 的 复合 复合 图像 图像 进行 <0.7 进行 进行 进行 进行 进行 进行 进行 进行 进行 进行 进行 进行 进行 进行 进行量化 进行 0 0.58 <0.58 使用 0.58 <0.58 使用 0 0.58 <0.58如 前所 前所, 自动 自动 מאַטלאַב 脚本 ((R2020a, מאַטווערקס) 来自 只 的 气管 图像 的 的 的 的 表达 表达 表达 表达 表达量化 使用 0,58,> 0.15 使用 <0.15 使用 <0.15 使用 <0.15 使用 <0.15 使用 <0.15 使用 <0.15 使用 <0.15 使用 <0.15 使用 <0.15 使用 <0.15 使用 <0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58,> 0,58> 前所前所 前所 前所 前所 前所 前所 前所 MATLAB ((R2020a, מאַטווערקס). . . . . ... . Области экспрессии LacZ на составных изображениях трахеи каждого животного количественно определяли с использованием автоматизированного сценария MATLAB (R2020a, MathWorks), как описано ранее, с использованием настроек 0,35 <оттенок <0,58, насыщенность> 0,15 и значение <0,7 . די סטיינד געביטן פון אַלע קאַמפּאַזאַט בילדער פון יעדער כייַע זענען סאַמד צו געבן די גאַנץ סטיינד שטח פֿאַר דעם כייַע.די פּיינטיד געגנט איז דאַן צעטיילט דורך די גאַנץ געגנט פון די מאַסקע צו באַקומען אַ נאָרמאַליזעד געגנט.
יעדער טראַטשעאַ איז געווען עמבעדיד אין פּעראַפאַן און סעקשאַנז 5 μם דיק.
אַלע סטאַטיסטיש אַנאַליזעס זענען דורכגעקאָכט אין GraphPad Prism v9 (GraphPad Software, Inc.).סטאַטיסטיש באַטייַט איז געווען באַשטימט ביי פּ ≤ 0.05.נאָרמאַליטי איז טעסטעד מיט די Shapiro-Wilk פּראָבע און דיפעראַנסיז אין LacZ סטיינינג זענען אַססעססעד מיט אַ אַנפּערד ה-פּרובירן.
די זעקס מפּס דיסקרייבד אין טאַבלע 1 זענען יגזאַמאַנד דורך PCXI, און די וויזאַביליטי איז דיסקרייבד אין טיש 2. צוויי פּאַליסטיירין מפּס (MP1 און MP2; 18 μm און 0.25 μm, ריספּעקטיוולי) זענען נישט קענטיק דורך PCXI, אָבער די רוען סאַמפּאַלז קען זיין יידענאַפייד (ביישפילן זענען געוויזן אין פיגורע 5).MP3 און MP4 זענען שוואַך קענטיק (10-15% Fe3O4; 0.25 μm און 0.9 μm, ריספּעקטיוולי).כאָטש MP5 (98% Fe3O4; 0.25 μm) קאַנטיינד עטלעכע פון ​​​​די קלענסטער פּאַרטיקאַלז טעסטעד, עס איז געווען די מערסט פּראַנאַונסט.די CombiMag MP6 פּראָדוקט איז שווער צו ויסטיילן.אין אַלע קאַסעס, אונדזער פיייקייט צו דעטעקט מפס איז געווען זייער ימפּרוווד דורך מאָווינג די מאַגנעט צוריק און צוריק פּאַראַלעל צו די קאַפּאַלערי.ווען די מאַגנאַץ אריבערגעפארן אַוועק פון די קאַפּאַלערי, די פּאַרטיקאַלז זענען פּולד אויס אין לאַנג קייטן, אָבער ווי די מאַגנאַץ אַפּראָוטשט און די מאַגנעטיק פעלד שטאַרקייַט געוואקסן, די פּאַרטאַקאַל קייטן פאַרקירצט ווען די פּאַרטיקאַלז מייגרייטיד צו דער אויבערשטער ייבערפלאַך פון די קאַפּאַלערי (זען סופּפּלעמענטאַל ווידעא ס 1) : MP4), ינקריסינג די פּאַרטאַקאַל געדיכטקייַט אויף די ייבערפלאַך.קאָנווערסעלי, ווען די מאַגנעט איז אַוועקגענומען פון די קאַפּאַלערי, די פעלד שטאַרקייַט דיקריסאַז און די מפּס ריעריינדזש אין לאַנג קייטן יקסטענדינג פון דער אויבערשטער ייבערפלאַך פון די קאַפּאַלערי (זען סאַפּלאַמענערי ווידעא ס 2: מפּ 4).נאָך די מאַגנעט סטאַפּס מאָווינג, די פּאַרטיקאַלז פאָרזעצן צו מאַך פֿאַר עטלעכע מאָל נאָך ריטשינג די יקוואַליבריאַם שטעלע.ווען די מפּ באוועגט צו און אַוועק פון דער אויבערשטער ייבערפלאַך פון די קאַפּאַלערי, די מאַגנעטיק פּאַרטיקאַלז טענד צו ציען דעבריס דורך די פליסיק.
די וויזאַביליטי פון מפּ אונטער PCXI וועריז באטייטיק צווישן סאַמפּאַלז.(אַ) מפּ 3, (ב) מפּ 4, (ג) מפּ 5 און (ד) מפּ 6.אַלע בילדער געוויזן דאָ זענען גענומען מיט אַ מאַגנעט פּאַזישאַנד בעערעך 10 מם גלייַך אויבן די קאַפּאַלערי.די קלאָר גרויס קרייזן זענען לופט באַבאַלז טראַפּט אין די קאַפּאַלעריז, קלאר ווייַזונג די שוואַרץ און ווייַס ברעג פֿעיִקייטן פון די פאַסע קאַנטראַסט בילד.די רויט קעסטל ינדיקייץ די מאַגנאַפאַקיישאַן וואָס ימפּרוווז די קאַנטראַסט.באַמערקונג אַז די דיאַמעטערס פון די מאַגנעט סערקאַץ אין אַלע פיגיערז זענען נישט צו וואָג און זענען בעערעך 100 מאל גרעסער ווי געוויזן.
ווי דער מאַגנעט באוועגט לינקס און רעכט צוזאמען די שפּיץ פון די קאַפּאַלערי, די ווינקל פון די מפּ שטריקל ענדערונגען צו ייַנרייען מיט די מאַגנעט (זען פיגורע 6), אַזוי דיליניייטינג די מאַגנעטיק פעלד שורות.פֿאַר MP3-5, נאָך די קאָרד ריטשאַז די שוועל ווינקל, די פּאַרטיקאַלז שלעפּן צוזאמען די אויבערשטער ייבערפלאַך פון די קאַפּאַלערי.דאָס אָפט רעזולטאַטן אין מפּס קלאַסטערינג אין גרעסערע גרופּעס לעבן ווו די מאַגנעטיק פעלד איז סטראָנגעסט (זען סאַפּלאַמענערי ווידעא ס 3: מפּ 5).דאָס איז אויך ספּעציעל קענטיק ווען ימידזשינג נאָענט צו די סוף פון די קאַפּאַלערי, וואָס ז די מפּ צו אַגגרעגירן און קאַנסאַנטרייט אין די פליסיק-לופט צובינד.די פּאַרטיקאַלז אין די MP6, וואָס זענען שווער צו ויסטיילן ווי די אין די MP3-5, האָבן נישט שלעפּן ווען די מאַגנעט איז אריבערגעפארן צוזאמען די קאַפּאַלערי, אָבער די MP סטרינגס זענען דיססאָסיאַטעד, און לאָזן די פּאַרטיקאַלז אין מיינונג (זען סאַפּלאַמענטערי ווידעא S4: MP6).אין עטלעכע פאלן, ווען די געווענדט מאַגנעטיק פעלד איז רידוסט דורך מאָווינג די מאַגנעט אַ לאַנג ווייַטקייט פון די ימאַגינג פּלאַץ, קיין רוען מפּס סלאָולי אַראָפּגיין צו די דנאָ ייבערפלאַך פון די רער דורך ערלעכקייט, רוען אין די שטריקל (זען סאַפּלאַמענערי ווידעא S5: MP3) .
דער ווינקל פון די MP שטריקל ענדערונגען ווען די מאַגנעט באוועגט צו די רעכט אויבן די קאַפּאַלערי.(אַ) מפּ 3, (ב) מפּ 4, (ג) מפּ 5 און (ד) מפּ 6.די רויט קעסטל ינדיקייץ די מאַגנאַפאַקיישאַן וואָס ימפּרוווז די קאַנטראַסט.ביטע טאָן אַז די נאָך ווידיאס זענען פֿאַר ינפאָרמיישאַנאַל צוועקן, ווייַל זיי אַנטדעקן וויכטיק פּאַרטאַקאַל סטרוקטור און דינאַמיש אינפֿאָרמאַציע וואָס קענען ניט זיין וויזשוואַלייזד אין די סטאַטיק בילדער.
אונדזער טעסץ האָבן געוויזן אַז סלאָולי מאַך די מאַגנעט צוריק און צוריק צוזאמען די טראַטשעאַ פאַסילאַטייץ די וויזשוואַלאַזיישאַן פון די מף אין דעם קאָנטעקסט פון קאָמפּלעקס באַוועגונג אין וויוואָו.קיין אין וויוואָו טעסץ זענען דורכגעקאָכט ווייַל די פּאַליסטיירין קרעלן (MP1 און MP2) זענען נישט קענטיק אין די קאַפּאַלערי.יעדער פון די רוען פיר מפס איז טעסטעד אין וויוואָו מיט די לאַנג אַקס פון די מאַגנעט פּאַזישאַנד איבער די טראַטשעאַ אין אַ ווינקל פון וועגן 30 ° צו די ווערטיקאַל (זען פיגיערז 2b און 3a), ווייַל דאָס ריזאַלטיד אין מער מף קייטן און איז געווען מער עפעקטיוו. ווי אַ מאַגנעט..קאַנפיגיעריישאַן טערמאַנייטיד.MP3, MP4 און MP6 זענען נישט געפֿונען אין די טראַטשעאַ פון קיין לעבעדיק אַנימאַלס.ווען וויזשוואַלייזינג די רעספּעראַטאָרי שעטעך פון ראַץ נאָך כיומאַנאַלי מאָרד די אַנימאַלס, די פּאַרטיקאַלז פארבליבן ומזעיק אפילו ווען נאָך באַנד איז צוגעגעבן מיט אַ שפּריץ פּאָמפּע.MP5 האט די העכסטן אייַזן אַקסייד אינהאַלט און איז געווען דער בלויז קענטיק פּאַרטאַקאַל, אַזוי עס איז געניצט צו אָפּשאַצן און קעראַקטערייז MP נאַטור אין וויוואָו.
פּלייסמאַנט פון די מאַגנעט איבער די טראַטשעאַ בעשאַס מף ינסערשאַן ריזאַלטיד אין פילע, אָבער ניט אַלע, מפס זייַנען קאַנסאַנטרייטאַד אין די פעלד פון מיינונג.טראַטשעאַל פּאָזיציע פון ​​פּאַרטיקאַלז איז בעסטער באמערקט אין כיומאַנאַלי יוטאַנייזד אַנימאַלס.פיגורע 7 און סאַפּלאַמענטערי ווידעא S6: MP5 ווייזט גיך מאַגנעטיק כאַפּן און אַליינמאַנט פון פּאַרטיקאַלז אויף די ייבערפלאַך פון די ווענטראַל טראַטשעאַ, וואָס ינדיקייץ אַז מפּס קענען זיין טאַרגעטעד צו די געבעטן געביטן פון די טראַטשעאַ.ווען איר זוכט מער דיסטאַללי צוזאמען די טראַטשעאַ נאָך MF עקספּרעס, עטלעכע מפס זענען געפונען נעענטער צו די קאַרינאַ, וואָס ינדיקייץ ניט גענוגיק מאַגנעטיק פעלד שטאַרקייַט צו זאַמלען און האַלטן אַלע מפס, זינט זיי זענען איבערגעגעבן דורך די געגנט פון מאַקסימום מאַגנעטיק פעלד שטאַרקייַט בעשאַס פליסיק אַדמיניסטראַציע.פּראָצעס.אָבער, פּאָסטנאַטאַל מפּ קאַנסאַנטריישאַנז זענען העכער אַרום די בילד געגנט, סאַגדזשעסטינג אַז פילע מפּס פארבליבן אין אַירווייַ מקומות ווו די מאַגנעטיק פעלד שטאַרקייט איז געווען העכסטן.
בילדער פון (אַ) איידער און (ב) נאָך עקספּרעס פון MP5 אין די טראַטשעאַ פון אַ לעצטנס יוטאַנייזד שטשור מיט אַ מאַגנעט געשטעלט פּונקט אויבן די ימאַגינג געגנט.די דיפּיקטיד געגנט איז ליגן צווישן צוויי קאַרטילאַדזשינאַס רינגס.עס איז עטלעכע פליסיק אין די ערווייז איידער די מפּ איז איבערגעגעבן.די רויט קעסטל ינדיקייץ די מאַגנאַפאַקיישאַן וואָס ימפּרוווז די קאַנטראַסט.די בילדער זענען גענומען פֿון די ווידעא פיטשערד אין S6: MP5 סאַפּלאַמענערי ווידעא.
מאָווינג די מאַגנעט צוזאמען די טראַטשעאַ אין וויוואָו ריזאַלטיד אין אַ ענדערונג אין די ווינקל פון די מפּ קייט אויף די אַירווייַ ייבערפלאַך, ענלעך צו די באמערקט אין קאַפּאַלעריז (זען פיגורע 8 און סאַפּלאַמענערי ווידעא ס 7: מפּ 5).אָבער, אין אונדזער לערנען, מפּס קען נישט זיין דראַגד צוזאמען די ייבערפלאַך פון לעבעדיק רעספּעראַטאָרי טראַקט, ווי קאַפּאַלעריז קען טאָן.אין עטלעכע קאַסעס, די MP קייט לענגטאַנז ווען די מאַגנעט באוועגט לינקס און רעכט.ינטערעסטינגלי, מיר אויך געפונען אַז די פּאַרטאַקאַל קייט ענדערונגען די טיפקייַט פון די ייבערפלאַך שיכטע פון ​​די פליסיק ווען די מאַגנעט איז אריבערגעפארן לאַנדזשאַטודאַנאַלי צוזאמען די טראַטשעאַ, און יקספּאַנדז ווען די מאַגנעט איז אריבערגעפארן גלייַך אָוווערכעד און די פּאַרטאַקאַל קייט איז ראָוטייטיד צו אַ ווערטיקאַל שטעלע (זען סאַפּלאַמענטערי ווידעא S7).: MP5 בייַ 0:09, דנאָ רעכט).די כאַראַקטעריסטיש באַוועגונג מוסטער געביטן ווען די מאַגנעט איז אריבערגעפארן לאַטעראַל אַריבער די שפּיץ פון די טראַטשעאַ (ד"ה, צו די לינקס אָדער רעכט פון די כייַע, אלא ווי צוזאמען די לענג פון די טראַטשעאַ).די פּאַרטיקאַלז זענען נאָך קלאר קענטיק בעשאַס זייער באַוועגונג, אָבער ווען די מאַגנעט איז אַוועקגענומען פון די טראַטשעאַ, די עצות פון די פּאַרטאַקאַל סטרינגס געווארן קענטיק (זען סאַפּלאַמענטערי ווידעא S8: MP5, סטאַרטינג בייַ 0:08).דאָס שטימען מיט די באמערקט נאַטור פון די מאַגנעטיק פעלד אונטער דער קאַמף פון אַ געווענדט מאַגנעטיק פעלד אין אַ גלאז קאַפּאַלערי.
מוסטער בילדער וואָס ווייַזן MP5 אין די טראַטשעאַ פון אַ לעבן אַנאַסטעטיקעד שטשור.(אַ) דער מאַגנעט איז געניצט צו קריגן בילדער אויבן און צו די לינקס פון די טראַטשעאַ, און (ב) נאָך מאָווינג די מאַגנעט צו די רעכט.די רויט קעסטל ינדיקייץ די מאַגנאַפאַקיישאַן וואָס ימפּרוווז די קאַנטראַסט.די בילדער זענען פֿון די ווידעא פיטשערד אין ס 7 ס סאַפּלאַמענערי ווידעא: MP5.
ווען די צוויי פּויליש זענען טונד אין אַ צפון-דרום אָריענטירונג אויבן און אונטער די טראַטשעאַ (ד"ה, אַטראַקטינג; Fig. 3b), די MP קאָרדז ארויס מער און זענען ליגן אויף די לאַטעראַל וואַנט פון די טראַטשעאַ אלא ווי אויף די דאָרסאַל ייבערפלאַך פון די טראַטשעאַ. טראַטשעאַ (זען אַפּפּענדיקס).ווידעא S9:MP5).אָבער, הויך קאַנסאַנטריישאַנז פון פּאַרטיקאַלז אין איין פּלאַץ (ד"ה די דאָרסאַל ייבערפלאַך פון די טראַטשעאַ) זענען נישט דיטעקטאַד נאָך פליסיק אַדמיניסטראַציע מיט אַ צווייענדיק מאַגנעט מיטל, וואָס יוזשאַוואַלי אַקערז מיט אַ איין מאַגנעט מיטל.דערנאָך, ווען איין מאַגנעט איז געווען קאַנפיגיערד צו אָפּשטויסן פאַרקערט פּויליש (פיגורע 3c), די נומער פון פּאַרטיקאַלז קענטיק אין די פעלד פון מיינונג האט נישט פאַרגרעסערן נאָך עקספּרעס.באַשטעטיקן ביידע צוויי מאַגנעט קאַנפיגיעריישאַנז איז טשאַלאַנדזשינג רעכט צו דער הויך מאַגנעטיק פעלד שטאַרקייַט וואָס אַטראַקץ אָדער פּושיז די מאַגנאַץ ריספּעקטיוולי.די סעטאַפּ איז דעמאָלט פארענדערט צו אַ איין מאַגנעט פּאַראַלעל צו די אַירווייַס אָבער דורכגעגאנגען דורך די אַירווייַס אין אַ 90 גראַד ווינקל אַזוי אַז די שורות פון קראַפט קראָסט די טראַטשעאַל וואַנט אָרטאָגאָנאַללי (פיגורע 3 ד), אַן אָריענטירונג בדעה צו באַשליסן די מעגלעכקייט פון פּאַרטאַקאַל אַגגרעגאַטיאָן אויף. די לאַטעראַל וואַנט.ווערן באמערקט.אָבער, אין דעם קאַנפיגיעריישאַן, עס איז קיין יידענאַפייד מף אַקיומיאַליישאַן באַוועגונג אָדער מאַגנעט באַוועגונג.באַזירט אויף אַלע די רעזולטאַטן, אַ קאַנפיגיעריישאַן מיט אַ איין מאַגנעט און אַ 30-גראַד אָריענטירונג איז אויסדערוויילט פֿאַר אין וויוואָו שטודיום פון דזשין קאַריערז (Fig. 3 אַ).
ווען די כייַע איז געווען ימאַדזשאַנד קייפל מאָל מיד נאָך כיומאַנאַלי מקריב געווען, די פעלן פון ינטערפירינג געוועב באַוועגונג מענט אַז פיינער, קירצער פּאַרטאַקאַל שורות קען זיין דיסערנד אין די קלאָר ינטערקאַרטילאַגינאָוס פעלד, 'סווייינג' אין לויט מיט די איבערזעצונג באַוועגונג פון די מאַגנעט.קלאר זען די בייַזייַן און באַוועגונג פון MP6 פּאַרטיקאַלז.
די טיטער פון LV-LacZ איז געווען 1.8 X 108 IU/mL, און נאָך מיקסינג 1: 1 מיט CombiMag MP (MP6), אַנימאַלס זענען ינדזשעקטיד מיט 50 μל פון אַ טראַטשעאַל דאָזע פון ​​9 X 107 IU / מל פון LV פאָרמיטל (ד"ה 4.5) רענטגענ 106 טו/שטשור).).).אין די שטודיום, אַנשטאָט פון מאָווינג די מאַגנעט בעשאַס אַרבעט, מיר פאַרפעסטיקט די מאַגנעט אין איין שטעלע צו באַשליסן אויב LV טראַנסדוקציע קען (אַ) זיין ימפּרוווד קאַמפּערד מיט וועקטאָר עקספּרעס אין דער אַוועק פון אַ מאַגנעטיק פעלד, און (ב) אויב די אַירווייַ קען זיין ימפּרוווד. זיין פאָוקיסט.די סעלז זענען טראַנסדוסעד אין די מאַגנעטיק ציל געביטן פון דער אויבערשטער רעספּעראַטאָרי שעטעך.
די בייַזייַן פון מאַגנאַץ און די נוצן פון CombiMag אין קאָמבינאַציע מיט LV וועקטאָרס האט נישט האָבן אַ נעגאַטיוו פּראַל אויף כייַע געזונט, ווי אונדזער נאָרמאַל LV וועקטאָר עקספּרעס פּראָטאָקאָל.פראָנטאַל בילדער פון די טראַטשעאַל געגנט אונטערטעניק צו מעטשאַניקאַל פּערטערביישאַן (סופּפּלעמענטאַרי פייג. 1) געוויזן אַז די לוו-מפּ באהאנדלט גרופּע האט באטייטיק העכער לעוועלס פון טראַנסדוקציע אין דעם בייַזייַן פון אַ מאַגנעט (Fig. 9 אַ).בלויז אַ קליין סומע פון ​​​​בלוי לאַקס סטיינינג איז געווען פאָרשטעלן אין די קאָנטראָל גרופּע (פיגורע 9 ב).קוואַנטיפיקאַטיאָן פון X-Gal-סטיינד נאָרמאַלייזד מקומות געוויזן אַז אַדמיניסטראַציע פון ​​LV-MP אין דעם בייַזייַן פון אַ מאַגנעטיק פעלד ריזאַלטיד אין אַ בעערעך 6-פאַרלייגן פֿאַרבעסערונג (Fig. 9c).
בייַשפּיל פון קאָמפּאָסיטע בילדער וואָס ווייַזן טראַטשעאַל טראַנסדוקציע מיט LV-MP (אַ) אין דעם בייַזייַן פון אַ מאַגנעטיק פעלד און (ב) אין דער אַוועק פון אַ מאַגנעט.(C) סטאַטיסטיש באַטייַטיק פֿאַרבעסערונג אין די נאָרמאַלייזד געגנט פון LacZ טראַנסדוקציע אין די טראַטשעאַ מיט די נוצן פון אַ מאַגנעט (* פּ = 0.029, ה-פּרובירן, n = 3 פּער גרופּע, מיינען ± נאָרמאַל טעות פון די דורכשניטלעך).
נייטראַל שנעל רויט-סטיינד סעקשאַנז (בייַשפּיל געוויזן אין סופּפּלעמענטאַרי פייג. 2) אנגעוויזן אַז לאַקז-סטיינד סעלז זענען פאָרשטעלן אין דער זעלביקער מוסטער און אין דער זעלביקער אָרט ווי פריער געמאלדן.
דער שליסל אַרויסרופן אין אַירווייַ דזשין טעראַפּיע בלייבט די גענוי לאָוקאַלאַזיישאַן פון טרעגער פּאַרטיקאַלז אין געביטן פון אינטערעס און די דערגרייה פון אַ הויך מדרגה פון טראַנסדוקטיאָן עפעקטיווקייַט אין די רירעוודיק לונג אין דעם בייַזייַן פון אַירפלאָוו און אַקטיוו מיוקאַס רעשוס.פֿאַר LV קאַריערז בדעה פֿאַר די באַהאַנדלונג פון רעספּעראַטאָרי חולאתן אין סיסטיק פיבראָסיס, ינקריסינג די וווינאָרט צייט פון די טרעגער פּאַרטיקאַלז אין די קאַנדאַקטיוו אַירווייַס איז ביז אַהער אַן אַנאַטאַינאַבאַל ציל.ווי געוויזן דורך Castellani עט על., די נוצן פון מאַגנעטיק פעלדער צו פאַרבעסערן טראַנסדוקציע האט אַדוואַנטידזשיז איבער אנדערע דזשין עקספּרעס מעטהאָדס אַזאַ ווי עלעקטראָפּאָראַטיאָן ווייַל עס קענען פאַרבינדן פּאַשטעס, עקאנאמיע, לאָוקאַלייזד עקספּרעס, געוואקסן עפעקטיווקייַט און קירצער ינגקיוביישאַן צייט.און עפשער אַ נידעריקער דאָזע פון ​​וועהיקלעס10.אָבער, אין וויוואָו דעפּאַזישאַן און נאַטור פון מאַגנעטיק פּאַרטיקאַלז אין די אַירווייַס אונטער דער השפּעה פון פונדרויסנדיק מאַגנעטיק פאָרסעס איז קיינמאָל דיסקרייבד, און אין פאַקט די פיייקייט פון דעם אופֿן צו פאַרגרעסערן דזשין אויסדרוק לעוועלס אין בעשאָלעם לעבעדיק אַירווייַס איז נישט דעמאַנסטרייטיד אין וויוואָו.
אונדזער אין וויטראָ יקספּעראַמאַנץ אויף די PCXI סינטשראָטראָן געוויזן אַז אַלע די פּאַרטיקאַלז מיר טעסטעד, אַחוץ די MP פּאַליסטיירין, זענען קענטיק אין די ימאַגינג סעטאַפּ וואָס מיר געוויינט.אין דעם בייַזייַן פון אַ מאַגנעטיק פעלד, מאַגנעטיק פעלדער פאָרעם סטרינגס, די לענג פון וואָס איז שייך צו די טיפּ פון פּאַרטיקאַלז און די שטאַרקייט פון די מאַגנעטיק פעלד (ד"ה, די פּראַקסימאַטי און באַוועגונג פון די מאַגנעט).ווי געוויזן אין פיגור 10, די סטרינגס וואָס מיר אָבסערווירן זענען געשאפן ווי יעדער יחיד פּאַרטאַקאַל ווערט מאַגנעטיק און ינדוסיז זיין אייגענע היגע מאַגנעטיק פעלד.די באזונדערע פעלדער ברענגען צוזאמען אנדערע ענליכע פּאַרטיקאַלז און זיך פארבינדן מיט גרופע שטריק באוועגונגען צוליב לאקאלע כוחות פון די לאקאלע כוחות פון צוציען און אפשטויסן פון אנדערע פּאַרטיקאַלז.
דיאַגראַמע ווייזונג (אַ, ב) קייטן פון פּאַרטיקאַלז פאָרמירונג ין פליסיק-אָנגעפילט קאַפּאַלעריז און (C, ד) אַ לופט-אָנגעפילט טראַטשעאַ.באַמערקונג אַז די קאַפּאַלעריז און טראַטשעאַ זענען נישט ציען צו וואָג.טאַפליע (אַ) אויך כּולל אַ באַשרייַבונג פון די מף מיט Fe3O4 פּאַרטיקאַלז עריינדזשד אין קייטן.
ווען דער מאַגנעט אריבערגעפארן איבער די קאַפּאַלערי, די ווינקל פון די פּאַרטאַקאַל שטריקל ריטשט די קריטיש שוועל פֿאַר MP3-5 מיט Fe3O4, נאָך וואָס די פּאַרטאַקאַל שטריקל איז ניט מער פארבליבן אין זיין אָריגינעל שטעלע, אָבער אריבערגעפארן צוזאמען די ייבערפלאַך צו אַ נייַע שטעלע.מאַגנעט.דעם ווירקונג מיסטאָמע אַקערז ווייַל די ייבערפלאַך פון די גלאז קאַפּאַלערי איז גלאַט גענוג צו לאָזן דעם באַוועגונג צו פאַלן.ינטערעסטינגלי, MP6 (CombiMag) האט נישט ביכייווד דעם וועג, טאָמער ווייַל די פּאַרטיקאַלז זענען קלענערער, ​​​​האט אַ אַנדערש קאָוטינג אָדער ייבערפלאַך אָפּצאָל, אָדער די פּראַפּרייאַטערי טראַנספּאָרט פליסיק אַפעקטאַד זייער פיייקייט צו רירן.דער קאַנטראַסט אין די CombiMag פּאַרטאַקאַל בילד איז אויך שוואַך, סאַגדזשעסטינג אַז די פליסיק און פּאַרטיקאַלז קען האָבן די זעלבע געדיכטקייַט און דעריבער קענען נישט לייכט מאַך צו יעדער אנדערער.פּאַרטיקאַלז קענען אויך זיין סטאַק אויב די מאַגנעט באוועגט צו שנעל, וואָס ינדיקייץ אַז די מאַגנעטיק פעלד שטאַרקייַט קען נישט שטענדיק באַקומען די רייַבונג צווישן פּאַרטיקאַלז אין די פליסיק, סאַגדזשעסטינג אַז די מאַגנעטיק פעלד שטאַרקייַט און די ווייַטקייט צווישן די מאַגנעט און די ציל געגנט זאָל נישט קומען ווי אַ יבערראַשן.וויכטיק.די רעזולטאטן אויך אָנווייַזן אַז כאָטש מאַגנאַץ קענען כאַפּן פילע מיקראָפּאַרטיקלעס פלאָוינג דורך די ציל געגנט, עס איז אַנלייקלי אַז מאַגנאַץ קענען זיין רילייד אויף צו רירן קאָמבימאַג פּאַרטיקאַלז צוזאמען די ייבערפלאַך פון די טראַטשעאַ.אזוי, מיר געפונען אַז אין וויוואָו LV MF שטודיום זאָל נוצן סטאַטיק מאַגנעטיק פעלדער צו פיזיקלי ציל ספּעציפיש געביטן פון די אַירווייַ בוים.
אַמאָל די פּאַרטיקאַלז זענען איבערגעגעבן אין דעם גוף, זיי זענען שווער צו ידענטיפיצירן אין דעם קאָנטעקסט פון די קאָמפּלעקס מאָווינג געוועב פון דעם גוף, אָבער זייער דיטעקשאַן פיייקייט איז ימפּרוווד דורך מאָווינג די מאַגנעט כאָריזאַנטאַלי איבער די טראַטשעאַ צו "וויגאַל" די MP סטרינגס.בשעת פאַקטיש-צייט ימידזשינג איז מעגלעך, עס איז גרינגער צו דערקענען פּאַרטאַקאַל באַוועגונג נאָך די כייַע איז כיומאַנאַלי געהרגעט.מפּ קאַנסאַנטריישאַנז זענען יוזשאַוואַלי העכסטן אין דעם אָרט ווען די מאַגנעט איז געווען פּאַזישאַנד איבער די ימאַגינג געגנט, כאָטש עטלעכע פּאַרטיקאַלז זענען יוזשאַוואַלי געפֿונען ווייַטער אַראָפּ די טראַטשעאַ.ניט ענלעך אין וויטראָ שטודיום, פּאַרטיקאַלז קענען ניט זיין דראַגד אַראָפּ די טראַטשעאַ דורך די באַוועגונג פון אַ מאַגנעט.דער דערגייונג איז קאָנסיסטענט מיט ווי די מיוקאַס וואָס קאָווערס די ייבערפלאַך פון די טראַטשעאַ טיפּיקלי פּראַסעסאַז ינכיילד פּאַרטיקאַלז, טראַפּינג זיי אין די מיוקאַס און דערנאָך קלאָר זיי דורך די מיקאָ-סיליאַרי רעשוס מעקאַניזאַם.
מיר כייפּאַטאַסייזד אַז ניצן מאַגנאַץ אויבן און אונטער די טראַטשעאַ פֿאַר אַטראַקשאַן (Fig. 3b) קען רעזולטאַט אין אַ מער מונדיר מאַגנעטיק פעלד, אלא ווי אַ מאַגנעטיק פעלד וואָס איז העכסט קאַנסאַנטרייטאַד אין איין פונט, פּאַטענטשאַלי ריזאַלטינג אין אַ מער מונדיר פאַרשפּרייטונג פון פּאַרטיקאַלז..אָבער, אונדזער פּרילימאַנערי לערנען האט נישט געפֿינען קלאָר זאָגן צו שטיצן דעם כייפּאַטאַסאַס.סימילאַרלי, באַשטעטיקן אַ פּאָר פון מאַגנאַץ צו אָפּשטויסן (פיג. 3 ק) האט נישט רעזולטאַט אין מער פּאַרטאַקאַל סעטאַלינג אין די בילד געגנט.די צוויי פיינדינגז באַווייַזן אַז די צווייענדיק-מאַגנעט סעטאַפּ טוט נישט באטייטיק פֿאַרבעסערן די היגע קאָנטראָל פון מפּ פּוינטינג, און אַז די ריזאַלטינג שטאַרק מאַגנעטיק פאָרסעס זענען שווער צו ניגן, וואָס מאכט דעם צוגאַנג ווייניקער פּראַקטיש.סימילאַרלי, אָריענטינג די מאַגנעט אויבן און אַריבער די טראַטשעאַ (פיגורע 3 ד) אויך האט נישט פאַרגרעסערן די נומער פון פּאַרטיקאַלז רוען אין די ימאַדזשד געגנט.עטלעכע פון ​​די אָלטערנאַטיוו קאַנפיגיעריישאַנז קען נישט זיין געראָטן ווייַל זיי פירן צו אַ רעדוקציע אין די מאַגנעטיק פעלד שטאַרקייַט אין די דעפּאַזישאַן זאָנע.אזוי, די איין מאַגנעט קאַנפיגיעריישאַן ביי 30 דיגריז (Fig. 3 אַ) איז געהאלטן די סימפּלאַסט און מערסט עפעקטיוו אין וויוואָו טעסטינג אופֿן.
די LV-MP לערנען געוויזן אַז ווען LV וועקטאָרס זענען קאַמביינד מיט CombiMag און איבערגעגעבן נאָך פיזיקלי אויפגערודערט אין דעם בייַזייַן פון אַ מאַגנעטיק פעלד, טראַנסדוקציע לעוועלס באטייטיק געוואקסן אין די טראַטשעאַ קאַמפּערד מיט קאָנטראָלס.באַזירט אויף סינטשראָטראָן ימידזשינג שטודיום און לאַקז רעזולטאַטן, די מאַגנעטיק פעלד איז געווען ביכולת צו האַלטן די לוו אין די טראַטשעאַ און רעדוצירן די נומער פון וועקטאָר פּאַרטיקאַלז וואָס גלייך דורכגעגאנגען טיף אין די לונג.אַזאַ טאַרגאַטינג ימפּרווומאַנץ קענען פירן צו העכער עפעקטיווקייַט בשעת רידוסינג איבערגעגעבן טיטערס, ניט-טאַרגעטעד טראַנסדוקציע, ינפלאַמאַטאָרי און ימיון זייַט יפעקס, און דזשין אַריבערפירן קאָס.ימפּאָרטאַנטלי, לויט דער פאַבריקאַנט, CombiMag קענען זיין געוויינט אין קאָמבינאַציע מיט אנדערע דזשין אַריבערפירן מעטהאָדס, אַרייַנגערעכנט אנדערע וויראַל וועקטאָרס (אַזאַ ווי AAV) און נוקלעיק אַסאַדז.